Cellartis人肝細胞培養完整解決方案

以肝臟細胞為模型的實驗越來越受到重視，在肝臟病變機理研究、藥物代謝研究、藥物毒理評估等方面有廣闊的應用前景。然而，以個體原代肝細胞為材料來源會產生如取材困難、材料批間差大、無法長期穩定供應等一系列難以克服的問題。因此，通過iPS批量轉化生產肝細胞的方法就顯示出特別的優勢。

Cellartis為iPS向肝臟細胞定向分化提供完整的解決方案。可以選擇iPS向肝臟細胞定向分化的完整試劑盒；也可以選擇iPS細胞定向分化至定型內胚層細胞試劑盒與分化定型內胚層細胞獲取肝臟細胞試劑盒，進行逐步誘導；或者直接購買肝臟細胞產品。

Cellartis升級的肝臟細胞完整培養系統，擁有更長實驗窗口、更優功能特性的肝臟細胞，分別是：新型的人原代肝臟細胞培養基、新版本的人iPS細胞來源肝臟細胞、完整即用的人iPS細胞向肝臟細胞定向分化試劑盒。

完整的培養系統

人iPS誘導分化成肝細胞全過程的完整試劑盒：Y30055（新產品）

人iPS來源肝細胞株及*培養基Y10133/Y10134/Y10135（新產品）

人原代肝臟細胞培養基 Y20020（新產品）

Y30055/Y30051 iPS向肝臟細胞定向分化操作系統

Y10133/Y10134/Y10135 人iPS干細胞來源肝細胞培養系統

Y20020 人原代肝臟細胞培養基

iPS逐步誘導分化成肝細胞

培養分化流程及對應產品貨號：

hiPS人誘導多能干細胞（Y00305）—分化培養（Y30035）—DE內胚層細胞（Y10040）—分化誘導（Y30050）—肝細胞

Y00305  人iPS誘導多能干細胞

Y30035  Cellartis定向分化獲取內胚層細胞試劑盒

Y10040  Cellartis定型內胚層干細胞

Y30050  Cellartis分化獲取肝細胞試劑盒

完整的培養系統

人原代肝臟細胞培養基

人原代肝臟細胞（Human primary hepatocytes, hphep) 是肝臟疾病毒理學研究和相關藥物研發的有力工具。對肝臟疾病模型研究和肝毒性檢測而言，一個穩健的hphep培養體系至關重要。然而，當前可用的培養體系培養的肝臟細胞在一周內就喪失了功能性和活性，嚴重限制了原代肝臟細胞的應用。而且，這些培養基維持培養中還需要每天換液。

Cellartis Power Primary HEP Medium是專門制定的、用于長期維持培養的人原代肝臟細胞培養基。凍存復蘇后接種的hphep，在方便操作的2D培養中，可以存活并維持功能特性4周。此外，這款培養基進一步簡化了肝細胞培養，提供一個周末免換液的培養日程。

iPS向肝臟細胞定向分化操作系統

Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System

iPS向肝臟細胞定向分化操作系統可以穩定地、規模化地實現iPS向肝細胞的誘導轉化生產，而且誘導轉化出的肝細胞能夠穩定表達藥物代謝相關酶系統和藥物轉運系統。

Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System是一套Do-It-Yourself系統，客戶既可以對某個特殊病人來源的iPS實現轉化，也可以利用cellartis供應的iPS進行標準化操作。使用本產品的過程起始于誘導人iPS轉化成為確定性內胚層（Definitive Endoderm (DE)）細胞，然后誘導轉化DE至肝細胞。本產品是All-In-One型產品，實驗所需的培養基、基質（coating）等包括在內。應用本產品轉化約3 × 106 hiPS cells,可以獲得約5 × 106 肝細胞（大約50 cm2面積的單層貼壁細胞）。

利用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System轉化得到的肝細胞除了清晰表現出肝細胞的*特征外（如肝細胞特異性標志物、CYP系列酶等），還保留了原始細胞供體者的遺傳基因背景。另外，相比較從組織切除獲得的原代肝臟細胞（通常需要低溫保存），通過本產品系統轉化獲得的肝細胞在更長的時間跨度上保持著生理功能的穩定性。這一點對于毒理學評估和病毒感染評估具有顯著的意義。為長時間維持培養hiPS轉化而來的肝細胞，我們推薦Cellartis Hepatocyte Maintenance Medium (Cat. No. Y30051)。

人iPS干細胞分化來的肝細胞培養系統：肝細胞+*培養基

Cellartis enhanced hiPS-HEP v2 kits 提供了可持續供應的、成熟的人誘導多能干細胞（hiPS）來源的肝臟細胞。在超過14天的檢測窗口期，hiPS-HEP細胞擁有功能性的藥物代謝機制，使其成為體外藥物研發、藥物代謝、和相關毒性研究的理想選擇；具備成熟、穩健的代謝特征，支持其作為代謝疾病模型。方便使用的試劑盒包括*的培養基和組份，用于長期檢測。與其他肝臟細胞模型相比，培養的Cellartis hiPS-HEP細胞存活時間更長，進而擁有更長的檢測窗口用于慢性-毒性實驗和作為代謝疾病模型研究。

iPS細胞定向分化內胚層細胞

Cellartis定向分化獲取內胚層細胞試劑盒

Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit

The Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit用于定向分化hiPS獲取definitive endoderm (DE) cells。本產品包含所有必需的培養基和coating材料。本產品還包括新一代的Cellartis DEF-CS 100 Culture System用于起始hiPS的維持培養用。使用本產品獲得的DE細胞，可以作為起始材料進行定向分化至內胚層來源的細胞類型(如肝細胞，胰腺細胞)。Cellartis也提供分化DE細胞獲取肝細胞的試劑盒（Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit (Cat. No. Y30050)；Cellartis也提供誘導分化hiPS獲取肝細胞的試劑盒（Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System (Cat. No. Y30055)。

Cellartis定型內胚層干細胞

Cellartis Definitive Endoderm Cells (from ChiPSC18)

Cellartis定型內胚層干細胞（DE cell）是從hiPS細胞株ChiPSC18經體外誘導分化得來。該產品中，大于90%的細胞顯示表達SOX17蛋白。該產品為低溫冷凍保存的細胞懸浮形式。本產品適合用于進一步誘導分化成為肝臟細胞類型或是胰臟細胞類型。特別地，Cellartis的肝臟細胞誘導分化試劑盒（Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit，Cat. No. Y30050）適合用于DE向肝臟細胞類型的誘導分化工作

內胚層細胞分化獲取肝細胞

Cellartis分化獲取肝細胞試劑盒

Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit

The Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit用于誘導內胚層細胞（definitive endoderm (DE)）獲取肝細胞。通過使用本產品獲取的肝細胞表現出符合預期的代謝酶表達，從而可以用于藥物代謝研究和毒理學篩選。本產品包含足夠的維持培養基用于正常為期11天的實驗。

The Cellartis Hepatocyte Differentiation Kit可以對廣泛來源的DE細胞進行定向分化：客戶自己的DE細胞，或是Cellartis提供的標準化DE細胞，或是客戶利用Cellartis Definitive Endoderm Differentiation Kit獲得的DE細胞。據估計，現在已經有28種發源于人類干細胞的DE細胞被成功測試可以使用本產品。特別地，如果客戶是用于大規模、要求持續穩定獲得肝細胞的相關用途，Cellartis推薦Definitive Endoderm Cells (from ChiPSC18)，用作起始DE細胞材料，或是用作陽性對照品。如果客戶要求的DE是來自于自有的樣本材料（patient-specific, or disease-specific），建議使用Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System (Cat. No. Y30055)。

背景介紹

肝臟是人體中重要的功能器官，具有分泌膽汁、參與體內血液解毒、物質代謝和合成運輸蛋白質等功能，肝臟內所進行的生化反應高達500種以上，也被稱為是機體的“化工廠”。肝臟細胞是肝臟疾病模型和ADME-Tox（absorption, distribution, metabolism, excretion, toxicity）研究者們重要的研究工具。目前市場上常用于進行肝臟相關的藥物開發，評估毒性，代謝研究的人源肝臟細胞有以下幾種：

原代肝臟細胞（human primary hepatocytes, hpheps）

永生化的肝臟細胞（Immortalized hepatocytes）

iPS細胞來源肝臟細胞（hiPS-derived hepatocytes, hiPS-HEP）

以下就三種肝臟細胞做了初步比較。

原代肝臟細胞

優點：

成熟的、典型的肝臟細胞特征

缺點：

取材困難，供體材料有限，無法長期供應，不同供體差異大 

在配套的培養基中培養，其活性和功能性也僅能維持一周 

屬于終端分化細胞，無法增殖培養，成本較高

永生化的肝臟細胞

優點：

來源于肝細胞癌（hepatocellular carcinoma），可實現體外增殖培養，無限供應，有效降低了成本

缺點：

不具備典型的、功能性的肝臟細胞表型

iPS細胞來源肝臟細胞

優點：

由人iPS細胞定向分化而來，與原代人肝臟細胞功能相似，并保留供體的遺傳背景 

iPS細胞可以穩健增殖，持續供應相同遺傳背景的肝臟細胞，批次間差異小，是一種獲得肝臟細胞的新方法

缺點：

不能*具備成熟的肝臟細胞表型

（Cellartis資料）

（Cellartis資料）

Cellartis 產品訂購信息

TAKARA收購的瑞典Cellartis公司擁有擁有超過40人的研發團隊，擁有超過15年的人干細胞研究經驗，建立并儲存了大量的人iPS和ES細胞系。

2018年，華雅旗下紅榮微再與TAKARA繼續合作，授權代理其旗下Cellartis 干細胞培養產品和Rubicon文庫構建產品。

紅榮微再以“傳遞科學價值，服務科學研究”為宗旨，主營干細胞、醫療、細胞治療、器官再生四大板塊的產品。

肝細胞培養詳情

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